膜片鉗實驗—溶液配置

       本文首先介紹膜片鉗吉歐封接實驗過程中需要的一些溶液配置、細胞培養(yǎng)及制備、實驗儀器及實驗材料。

1試劑與溶液

Dispase II為Roche公司產(chǎn)品，胎牛血清、BSA為Gibco產(chǎn)品，其他試劑均為Sigma產(chǎn)品。

標(biāo)準(zhǔn)KRBB(Krebs Ringer Bicarbonate Buffer)生理溶液：

NaCl 136mM、KCl 4.70mM、KH2PO4 1.20mM、NaHCO3 5mM、CaCl2 2.5mM、MgSO4.7H2O 1.2mM、HEPES 10mM、BSA 1 mg/ml、Glucose 3mM、Peniclline 100u/mL PH=7.0 with NaOH。

標(biāo)準(zhǔn)細胞外液：

NaCl 150mM、KCl 2.8mM、MgCl2.6H2O 1mM、 HEPES 10mM、 Glucose 5mM、CaCl2.2H2O 2.5mM   pH=7.2   滲透壓 310 mosm。

電極內(nèi)液：

CsGlu 125mM、HEPES 10mM、MgATP 2mM、Na2GTP 0.3mM、MgCl2.6H2O 1mM、EGTA 0.31mM   pH=7.2   with CsOH   滲透壓 300 mosm。

DMEM培養(yǎng)液：

DMEM(Cat.No.31600-026) 10mg/ml、NaHCO3 2mg/ml、HEPES 10mM、Peniclline 100u/mL、Strep. 100μg/ml   PH=7.0 with NaOH。